T/CSTC 33-2025 蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查 液相色谱-串联质谱法

　　ICS 67.080.01 CCS B 31

　　CSTC

　　中 国 热 带 作 物 学 会 团 体 标 准

　　T/CSTC 33—2025

　　蔬菜和水果中 100 种农药残留的快速筛查

　　液相色谱-串联质谱法

　　Rapid screening of 100 pesticide residues in tropical fruits and vegetables_Liquid

　　chromatography-tandem mass spectrometry method

　　2025 - 08 - 29 发布 2025 - 09 - 01 实施

　　中国热带作物学会 发 布

　　T/CSTC 33—2025

　　前 言

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由中国热带作物学会提出并归口。

　　本文件起草单位：中国热带农业科学院分析测试中心、海南省现代农业检验检测预警防控中心、三亚市农业技术服务中心。

　　本文件主要起草人：张振山、黎舒怀、刘春华、吴学进、龚敏、何婷、李春丽、李萍萍、吴南村、黄燕霞、钟丽琪、尹桂豪、蒙雪茹、邢孔攀、李晓慧、黎小菊。

　　T/CSTC 33—2025

　　蔬菜和水果中 100 种农药残留的快速筛查 液相色谱-串联质谱法

　　1 范围

　　本文件规定了蔬菜和水果中 100 种农药残留的快速筛查方法。

　　本文件适用于蔬菜和水果中克百威等 100 种农药残留的定性鉴别和定量筛查。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　GB/T 8855 新鲜果蔬 取样方法

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 原理

　　试样用乙腈提取，提取液经固相萃取净化，液相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量。

　　5 试剂和材料

　　除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　5.1 试剂

　　5.1.1 乙腈(CH3CN ，CAS 号：75-05-8)，色谱纯。

　　5.1.2 甲醇(CH3OH ，CAS 号：67-56- 1)，色谱纯。

　　5.1.3 乙酸铵(CH3COONH4 ，CAS 号：631-61-8)。

　　5.2 溶液配制

　　乙酸铵水溶液(5 mmol/L)：称取 0.385 g 乙酸铵，用水溶解并稀释至 1 000 mL ，摇匀。

　　5.3 标准品

　　100种农药标准品，见附录A ，纯度≥95%。

　　5.4 标准溶液配制配制步骤如下：

　　a) 标准储备溶液(1 000 mg/L)：准确称取约 10 mg(精确至 0. 1 mg)各农药标准品，用乙腈(5. 1. 1)或甲醇(5. 1.2)溶解并分别定容至 10 mL 。避光 -18 ℃ 及以下条件保存，有效期 1 年。

　　b) 混合标准溶液(10.0 mg/L) ：准确吸取浓度为 1 000 mg/L 各标准储备溶液 1.00 mL 于容量瓶中，用乙腈或甲醇溶解并定容至 100 mL 。避光 -18 ℃ 及以下条件保存，有效期 6 个月。

　　c) 混合标准溶液(1.0 mg/L) ：准确吸取浓度为 10.0 mg/L 混合标准溶液 1.00 mL 于容量瓶中，用乙腈溶解并定容至 10 mL 。避光 -18 ℃ 及以下条件保存，有效期 1 个月。

　　5.5 材料

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　　5.5.1 提取管：50 mL ，含萃取盐 2 g ，或相当者。

　　5.5.2 挤压式一步固相萃取柱：3 mL ，含净化填料 180 mg ，或相当者。

　　5.5.3 微孔滤膜(有机相)：13 mm × 0.22 μm ，或相当者。

　　6 仪器

　　主要仪器如下：

　　a) 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源(ESI);

　　b) 分析天平：感量 0. 1 mg 和 0.01 g;

　　c) 离心机：转速不低于 4 000 r/min;

　　d) 组织捣碎机;

　　e) 涡旋混合器。

　　7 试样制备

　　7.1 试样制备

　　方法如下：

　　a) 样品取样部位按照 GB 2763 中的规定执行：

　　——需去核的样品，取样时先去除果核，再进行后续处理;

　　——对于个体较小的样品，取样后全部处理;

　　——对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理;

　　——对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理;

　　b) 取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中， 制备好的样品不少于 100 g。

　　7.2 试样储存

　　将试样按照测试和备用分别置于 -18 ℃ 及以下条件保存。

　　8 分析步骤

　　8.1 提取

　　称取5 g试样(精确至0.01 g)于提取管(5.5. 1)中，加入 5 mL 乙腈，剧烈振荡 2 min 后4 000 r/min离心 5 min ，吸取 1 mL 上清液于挤压式一步固相萃取柱(5.5.2)中，下接微孔滤膜(5.5.3)，以每秒 1滴的流速缓慢过滤于进样瓶中，用于测定。

　　8.2 测定

　　8.2.1 液相色谱条件

　　液相色谱参考条件如下：

　　1) 色谱柱：C18 柱，2. 1 mm(内径) × 50 mm ，粒径 1.7 μm ，或相当者;

　　2) 流动相：A 相为乙酸铵水溶液(5.2. 1)，B 相为甲醇，流动相及其梯度条件见表 1;

　　3) 流速：0.3 mL/min;

　　4) 柱温：35 ℃;

　　5) 进样量：5 µL。

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　　表 1 流动相及其梯度条件(VA+VB)

　　8.2.2 质谱条件

　　质谱参考条件如下：

　　1) 离子源类型： 电喷雾离子源;

　　2) 扫描方式：正离子和负离子同时扫描;

　　3) 电喷雾电压：正源 5 500 V ，负源 -4 500 V;

　　4) 离子源温度：550 ℃;

　　5) 雾化气：344.7 kPa;

　　6) 辅助加热气：55.2 kPa;

　　7) 气帘气：172.4 kPa;

　　8) 多反应监测：每种农药分别选择至少2 个子离子。所有需要检测的离子对按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录 B。

　　8.2.3 基质匹配标准工作曲线

　　选择与被测样品性质相同或相似的空白样品，按照 8. 1 步骤进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为 0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、 0.05 mg/L 、0.08 mg/L 、0. 10 mg/L 和 0.20 mg/L 的标准工作溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。

　　8.2.4 定性及定量

　　8.2.4.1 定性方法

　　(1)保留时间

　　被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在± 2.5%之内。

　　(2)离子丰度比

　　在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差符合表 2 规定，则可判断样品中存在目标农药。

　　表 2 定性时相对离子丰度的最大允许偏差

　　注：本方法的标准物质多反应监测 UPLC-MS/MS 色谱图见附录 C。

　　8.2.4.2 定量方法

　　外标法定量。

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　　8.3 试样溶液测定

　　将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-质谱联用仪中，保留时间和离子丰度比定性，测得定量离子的质量色谱图峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行稀释后再进行分析。

　　8.4 平行试验

　　按照 8. 1 ～ 8.3 步骤对同一试样进行平行试验测定。

　　8.5 空白试验

　　除不加试样外，按照 8. 1 ～ 8.4 的测定步骤进行平行操作。

　　9 结果计算

　　试样中各农药残留量以质量分数 ω 计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)或公式(2)计算。

　　式(1)中：

　　ω 试样中被测物残留量的数值，单位为毫克每千克(mg/kg);

　　ρ1 基质匹配标准工作溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升(mg/L);

　　A ——试样溶液中被测物的质量色谱峰面积;

　　As ——基质匹配标准工作溶液中被测物的质量色谱图峰面积;

　　V ——提取液体积的数值，单位为毫升(mL);

　　m ——试样质量的数值，单位为克(g)。

　　式(2)中：

　　ω 试样中被测物残留量的数值，单位为毫克每千克(mg/kg);

　　ρ2 从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升

　　(mg/L);

　　V ——提取液体积的数值，单位为毫升(mL);

　　m ——试样质量的数值，单位为克(g);

　　计算结果以重复性条件下获得的 2 次独立测定结果的算术平均值表示，保留2 位有效数字，含量超

　　1 mg/kg 时保留 3 位有效数字。

　　10 精密度

　　在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r)，见附录 D. 1。

　　在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R)，见附录 D.2。

　　11 其他

　　本方法对各种化合物的定量限为 0.005 mg/kg ～ 0.01 mg/kg(见附录 E)。

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　　附 录 A

　　(资料性)

　　100 种农药中英文名称对照索引(按英文字母顺序)

　　100 种农药中英文名称对照索引见表 A. 1。

　　表 A.1 100 种农药中英文名称对照索引表

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　　表 A.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　表 A.1 (续)

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　　附 录 B

　　(资料性)

　　100 种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数

　　100 种农药的保留时间、母离子、子离子等质谱分析参数见表 B.1。

　　表 B.1 100 种农药的保留时间、离子对及质谱分析参数

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　　表 B.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　表 B.1 (续)

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　　附 录 C

　　(资料性)

　　100 种农药多反应监测(MRM)质量色谱图

　　100 种农药多反应监测(MRM)质量色谱图见图 C.1。

　　图 C.1 100 种农药多反应监测(MRM)质量色谱图

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　　11. 噻嗪酮(buprofezin)

　　13. 多菌灵 (carbendazim)

　　15. 丁硫克百威(carbosulfan)

　　17. 灭幼脲 (chlorbenzuron)

　　19. 虫螨腈 (chlorfenapyr)

　　20. 氟啶脲

　　(chlorfluazuron)

　　图 C.1 (续)

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　　21. 毒死蜱 22. 噻虫胺

　　(chlorpyrifos) (clothianidin)

　　23. 蝇毒磷 24. 灭蝇胺

　　(coumaphos) (cyromazine)

　　25. 内吸磷(demeton)

　　26. 二嗪磷(diazinon)

　　27. 敌敌畏(dichlorvos)

　　28. 苯醚甲环唑(difenoconazole)

　　29. 除虫脲 (diflubenzuron)

　　30. 乐果 (dimethoate)

　　图 C.1 (续)

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　　31. 烯酰吗啉 32. 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐

　　(dimethomorph) (emamectin benzoate)

　　33. 灭线磷 34. 醚菊酯

　　(ethoprophos) (etofenprox)

　　35. 氯苯嘧啶醇(fenarimol)

　　36. 腈苯唑 (fenbuconazole)

　　37. 杀螟硫磷(fenitrothion)

　　38. 倍硫磷(fenthion)

　　39. 倍硫磷砜 (fenthion sulfone)

　　40. 倍硫磷亚砜 (fenthion sulfoxide)

　　图 C.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　图 C.1 (续)

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　　51. 异菌脲 52. 氯唑磷

　　(iprodione) (isazofos)

　　53. 水胺硫磷 54. 甲基异柳磷

　　(isocarbophos) (isofenphos-methyl)

　　55. 异丙威(isoprocarb)

　　56. 醚菌酯

　　(kresoxim-methyl)

　　57. 马拉硫磷(malathion)

　　58. 甲霜灵(metalaxyl)

　　59. 甲胺磷

　　(methamidophos)

　　60. 灭多威(methomyl)

　　图 C.1 (续)

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　　61. 速灭磷(mevinphos)

　　63. 腈菌唑 (myclobutanil)

　　65. 多效唑 (paclobutrazol)

　　67. 二甲戊灵 (pendimethalin)

　　69. 甲拌磷砜 (phorate sulfone)

　　70. 甲拌磷亚砜 (phorate sulfoxide)

　　图 C.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　79. 丙环唑 (propiconazole)

　　图 C.1 (续)

　　80. 吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)

　　T/CSTC 33—2025

　　81. 哒螨灵 82. 嘧霉胺

　　(pyridaben) (pyrimethanil)

　　83. 乙基多杀菌素 J 84. 乙基多杀菌素 L

　　(spinetoram J) (spinetoram L)

　　85. 多杀霉素 A (spinosyn A)

　　86. 多杀霉素 D (spinosyn D)

　　87. 螺螨酯 (spirodiclofen)

　　88. 戊唑醇 (tebuconazole)

　　89. 虫酰肼 (tebufenozide)

　　90. 特丁硫磷(terbufos)

　　图 C.1 (续)

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　　图 C.1 (续)

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　　附 录 D

　　(资料性)精密度的表示和计算

　　D.1 重复性限(r)

　　见表 D.1。

　　表 D.1 重复性限(r)

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　　表 D.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　表 D.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　D.2 再现性限(R)

　　见表 D.2。

　　表 D.2 再现性限(R)

　　T/CSTC 33—2025表 D.2(续)

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　　表 D.2 (续)

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　　附 录 E

　　(资料性)

　　100 种农药中英文名称和方法定量限

　　100 种农药的中英文名称和方法定量限见表 E. 1。

　　表 E.1 100 种农药中英文名称和方法定量限

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　　表 E.1 (续)

　　T/CSTC 33—2025

　　表 E.1 (续)