T/CVDA 23-2024 动物疫苗复合 白油 佐剂 （ 水包油型 ）（ （YSK M902 ）

　　ICS 11.220 B 42

　　T/CVDA

　　团 体 标 准

　　T/CVDA 8-2024

　　动物疫苗复合白油佐剂 (水包油型)(YSK M902)

　　Animal vaccine compound white oil adjuvant

　　(Oil~in~water type)(YSK M902)

　　(发布稿)

　　2024-09-29 发布 2024-10-01 实施

　　中国兽药协会发布

　　目 录

　　前 言 1

　　1 范围 1

　　2 规范性引用文件 1

　　3 术语和定义 1

　　3.1 佐剂 1

　　3.2 白油佐剂 1

　　3.3 复合白油佐剂(水包油型) 1

　　4 缩略语 2

　　5 质量要求 2

　　5.1 基本要求 2

　　5.2 制备 2

　　5.3 性状 3

　　5.4 技术指标 3

　　5.5 装量检查 3

　　6 用法用量 3

　　7 检验方法 3

　　7.1 性状检验 3

　　7.2 相对密度测定 4

　　7.3 酸值 4

　　7.4 皂化值 4

　　7.5 过氧化值 4

　　7.6 安全检验 4

　　8 检验规则 4

　　8.1 组批 4

　　8.2 采样 4

　　8.3 出厂检验 5

　　8.4 型式检验 5

　　9 标签、包装、运输、贮存、 保存期 5

　　9.1 标签 5

　　9.2 包装 5

　　9.3 运输 6

　　9.4 贮存 6

　　9.5 保存期 6

　　10 附录 1

　　前 言

　　本标准按GB/T 1.1~2020《标准化工作导则 第一部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定编写。

　　本标准由中国兽药协会提出并归口管理。

　　本标准起草单位：浙江理工大学、杭州依思康医药科技有限公司、浙江洪晟生物科技股份有限公司、天津瑞普生物技术股份有限公司、浙江鼎持生物制品有限公司、武汉科前生物股份有限公司、青岛蔚蓝动物保健集团有限公司、乾元浩生物股份有限公司、兆丰华生物科技(福州)有限公司、江西博美莱生物科技有限公司、山东海利生物制品有限公司、成都史纪生物制药有限公司、天康生物制药有限公司、金宇保灵生物药品有限公司、成都依思康生物科技有限公司。

　　本标准起草人：冯华朋、舒建洪、邹智坤、张金鸽、何玉龙、徐新星、童夏霞、张静苗、吴超、柴文琴、唐荣宏、马宁宁、苗玉和、徐高原、周明光、付霁阳、张华伟、徐宏军、丛雁方、韩成昊、阮继湘、李海鹰、王增福、倪娇、赵成全、江兴华、邹伟斌、巢伟、汪云、刘守川、张恒、金鑫、沈元、岳丰雄、王钢、赵丽霞、刘艳霞、张永峰、柏芝成、董永明、潘倩、王波。

　　本标准为首次制定。

　　1

　　动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)

　　1 范围

　　本标准规定了动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)的质量要求、用法用量、检验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存及保存期。

　　本标准适用于动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)的加工、贮存和使用。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　《中华人民共和国兽药典(2020年版)》： 生产和检定用设施、原材料及辅料、注射用水、器具等应符合本有关规定要求

　　GB/T 191~2008 包装储运图示标志：动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)的包装储运图示标志的名称、图形符号、尺寸、颜色及应用方法应符合本规定要求

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本标准。

　　3.1 佐剂

　　佐剂(Adjuvant)是一种添加到疫苗中以刺激和增强免疫反应强度和持久性的物质，同时添加佐剂也具有避免实际疫苗接种过程中因为个体差异、接种程序不同、接种时间不定等问题而造成的免疫效果不理想的问题。

　　3.2 白油佐剂

　　油乳佐剂作为佐剂类型之一，其在组成成分的选择以及组成形式上更具多样性，具有更多种刺激产生免疫增强的方式。油乳佐剂的重要成分是矿物油，受成本原因的限制，白油使用量占比最大。当前乳剂主要分为油包水乳剂(W/O)、水包油乳剂(O/W)、水包油包水乳剂(W/O/W)三种类型。

　　3.3 复合白油佐剂(水包油型)

　　水包油乳剂(O/W)主要将少量的油滴分散在高体积比的水相中，黏度较低，进入机体后随体液快速流动，不易在注射部位囤积形成抗原库;相反，油滴促进了趋化因子驱动的免疫细胞募集，有效提升抗原摄取能力。复合白油佐剂(水包油型)是以优质医药级矿物油、

　　1

　　新型表面活性剂、免疫活性物质为主要原料，可刺激吞噬细胞对抗原的处理，快速刺激机体产生免疫反应，使疫苗抗原的特异性免疫大幅度提高，并促进抗原的细胞和体液免疫，提高动物整体免疫力和生产性能。

　　4 缩略语

　　下列缩略语适用于本标准。

　　rpm：转/每分(revolutions per minute)

　　h：小时(hour)

　　μm：微米(micron)

　　mg：毫克(milligram)

　　g：克(gram)

　　kg：千克(kilogram)

　　KOH：氢氧化钾(potassium hydroxide)

　　meq：毫克当量(milliequivalent)

　　w：质量(weight)

　　℃：摄氏度(degree celsius)

　　min：分钟(minute)

　　ml：毫升(milliliter)

　　mm：毫米(millimetre)

　　L：升(liter)

　　%：百分号(percent)

　　s：秒(second)

　　5 质量要求

　　5.1 基本要求

　　生产和检定用设施、原材料及辅料、注射用水、器具等应符合《中华人民共和国兽药典(2020年版)》的有关要求。

　　5.2 制备

　　取多种表面活性剂、免疫活性物质和医药级白油，按照一定比例投入配制罐，100~200 rpm搅拌2~3 h，混匀后，采用0.22 μm滤芯过滤分装，即得动物疫苗复合白油佐剂(水包油

　　2

　　型)(YSK M902)。

　　5.3 性状

　　澄清透明液体。

　　5.4 技术指标

　　技术指标及质量应符合表1的要求。

　　表1 动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)的质量指标

　　项目

　　指标

　　相对密度

　　0.800~ 1.000

　　酸值

　　0.0~0.5 mgKOH/g

　　皂化值

　　13~35 mgKOH/g

　　过氧化值

　　0.0~4.0 meq/kg

　　安全检验

　　应不出现局部或全身不良反应

　　5.5 装量检查

　　定量包装商品净含量计量检验规则应符合表2的要求。

　　表2 动物疫苗复合白油佐剂(水包油型)(YSK M902)的装量检查标准

　　净含量Q(kg)

　　不低于标示量

　　Q的百分比

　　1

　　1

　　20

　　1

　　175

　　1

　　6 用法用量

　　适用于猪、牛、羊等动物用灭活疫苗、亚单位疫苗和合成肽疫苗。猪等动物推荐佐剂与抗原以1:9(w/w)比例，按照附录1的乳化方法使用。本品建议使用前过滤除菌或121℃、30 min高温灭菌，混合均匀后备用。

　　7 检验方法

　　7.1 性状检验

　　3

　　取本品适量，在无色透明容器内，在自然光条件下，目测其外观应为澄清透明液体。

　　7.2 相对密度测定

　　取本品适量，依法检查(《中华人民共和国兽药典(2020年版)(一部)》附录0601)，相对密度应为0.800~1.000。

　　7.3 酸值

　　取本品适量，置于250 ml锥形瓶中，依法检查(《中华人民共和国兽药典(2020年版) (一部)》附录0713)，其酸值应为0.0~0.5 mgKOH/g。

　　7.4 皂化值

　　取本品适量，置250 ml碘瓶中，依法检查(《中华人民共和国兽药典(2020年版)(一部)》通则0713)，其过氧化值应为13~35mgKOH/g。

　　7.5 过氧化值

　　取本品适量，置250 ml碘瓶中，依法检查(《中华人民共和国兽药典(2020年版)(一部)》通则0713)，其过氧化值为0.0~4.0meq/kg。

　　7.6 安全检验

　　7.6.1 动物安全试验—猪

　　21~28日龄健康仔猪，随机分为生理盐水对照组与佐剂试验组，每组5头。生理盐水对照组每头肌肉注射无菌生理盐水2ml。佐剂试验组每头肌肉注射复合白油佐剂(水包油型)乳液2 ml。每日定时测定体温，观察14日。试验组间，应未见试验动物出现局部或全身不良反应。

　　7.6.2 动物安全试验—小鼠

　　20~22 g健康昆明雌鼠，随机分为生理盐水对照组与佐剂试验组，每组5只。生理盐水对照组每只注射无菌生理盐水1.0 ml，试验组每只注射复合白油佐剂(水包油型)乳液1.0ml 。每日定时观察小鼠精神、食欲、活动及小鼠存活情况，观察14日。试验组动物应全部存活，剖检未见脏器异常。

　　8 检验规则

　　8.1 组批

　　以相同材料、相同生产工艺、连续生产或同一班次生产的产品为一批。

　　8.2 采样

　　采样按《兽药质量监督抽样规定》的规定执行。

　　4

　　8.3 出厂检验

　　8.3.1 出厂检验项目

　　出厂检验项目为：性状、酸值、皂化值、过氧化值等指标进行检验，合格后发出合格证方可出厂。

　　8.3.2 判断方法

　　所检项目检测结果均符合本标准规定指标判定为合格产品。

　　检验结果中如有一项指标不符合本标准规定时，可在原批中重新抽样对不符合项进行复验，若复验结果仍不符合本标准规定，则判定该批产品为不合格。

　　8.4 型式检验

　　8.4.1 型式检验项目为第5章规定的全部项目。

　　8.4.2 产品正常生产时，每半年至少进行一次型式检验，但有下列情况之一时，应进行型式检验：

　　a)改变配方或生产工艺;

　　b)原料、设备、加工工艺有较大改变时;

　　c)产品停产3个月以上，恢复生产时;

　　d)出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时;

　　e)当兽药管理部门提出进行型式检验要求时。

　　8.4.3 判定方法

　　所检项目检测结果均与本标准规定指标一致判定为合格产品。

　　所检结果中如有一项指标不符合本标准规定时，可在原批中重新抽样对不符合项进行复验，若复验结果仍不符合本标准规定，则判定该批产品为不合格。

　　9 标签、包装、运输、贮存、保存期

　　9.1 标签

　　标签内容包括：产品名称，规格，用量用法，生产批号，生产日期，有效期，生产厂家，地址，电话等。

　　9.2 包装

　　1 kg/瓶、20 kg/桶、175 kg/桶。

　　包装材料符合国家药品包装材料卫生标准的要求。封口严密，包装牢固。产品用塑料瓶、桶进行包装。

　　5

　　9.3 运输

　　常温运输。

　　9.4 贮存

　　常温避光保存。

　　9.5 保存期

　　在符合标准规定的包装、运输、贮存条件下，保存期为2年。

　　6

　　10 附录

　　附录A

　　(资料性附录)

　　乳化

　　1 实验室规模

　　1.1 磁力搅拌器(50~100 ml)

　　分别称取准备无菌佐剂和水相(佐剂:水相=1:9质量比)，在500~700 rpm的搅拌速度下，将佐剂加入水相中(3 s完成，5~10 L/min)，搅拌10~15min。

　　1.2 低剪切搅拌器(100~500 ml)

　　分别称取准备无菌佐剂15 g和水相135g(佐剂:水相=1:9质量比)，将低剪切搅拌器(4叶叶轮，直径50 mm)安装至装有佐剂的高型玻璃烧杯中，在500 rmp搅拌下将水相加入佐剂中(3 s完成，5~10 L/min)，搅拌10~15 min。

　　在此实验室规模，为避免在搅拌轴上残留没有乳化的佐剂，所以将水相快速倒入佐剂中。

　　2 小试规模(0.5~2 L)

　　根据所需量分别称取准备无菌佐剂和水相(佐剂:水相=1:9质量比)，选择与搅拌设备相匹配的搅拌桨，在低速(500 rpm)搅拌下将佐剂加入水相中(3 s完成，5~10 L/min)，避免将佐剂直接倒进漩涡或搅拌轴上，搅拌10~15min。

　　3 大规模(300 L)

　　根据所需量分别准备佐剂和水相(佐剂:水相=1:9 质量比)，分别装于双层夹套的罐中。佐剂用0.22 μm滤芯灭菌。开始搅拌佐剂，调节速度为低速(100~130 rpm)，产生搅拌且没有飞溅，然后在7~10 L/min的流速下(大约15~20 min)把水相添加到装佐剂的乳化罐中。随着粘度增大需增加搅拌速度。抗原相完全加入后，持续搅拌30 min。如果有必要，调节搅拌速度(100~150 rpm)。

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